❶ 核酸检测具体步骤
1、核酸提取使用硅胶柱离心、磁性硅胶颗粒分离方法以及自动化仪器等商品化试剂或设备并按说明书操作。提取RNA时应注意防止RNA降解。DNA应置于-20℃保存,RNA和需长期保存的DNA应置于-80℃保存。
2、逆转录合成cDNA。逆转录cDNA合成反应需使用逆转录引物、dNTPs、逆转录酶、RNA酶抑制剂、DTT、缓冲液和适量无RNA/DNA酶的超纯水以及RNA模板。在扩增仪或水浴箱中,在规定的温度和时间下进行逆转录反应。
3、PCR扩增反应PCR反应需使用引物、dNTPs、DNA聚合酶、缓冲液、和适量无RNA/DNA酶超纯水、以及模板。在扩增仪中,按照设定的程序进行扩增。使用二次扩增的套式PCR扩增方法。
4、扩增产物定性分析;扩增产物常用分析方法是琼脂糖凝胶电泳法,与分子量标准比较,判断扩增片段是否在预期的分子量范围内。其它扩增产物分析方法还有限制性内切酶酶切分析、特异性探针杂交分析以及DNA序列分析等。
5、结果判定和完成报告单:每一次检测需同时做两个阳性对照、两个阴性对照,只有阳性对照扩增出预期的片段、阴性对照没有扩增出任何片段、双份平行样品结果一致的情况下实验才成立,可以作出核酸阳性或阴性反应结果的判定。
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检测新型冠状病毒特异序列的方法最常见的是荧光定量PCR。因PCR反应模板仅为DNA,因此在进行PCR反应前,应将新型冠状病毒核酸逆转录为DNA。在PCR反应体系中,
包含一对特异性引物以及一个Taqman探针,该探针为一段特异性寡核苷酸序列,两端分别标记了报告荧光基团和淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;
如反应体系存在靶序列,PCR反应时探针与模板结合,DNA聚合酶沿模板利用酶的外切酶活性将探针酶切降解,报告基团与淬灭基团分离,发出荧光。
每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子产生。荧光定量PCR仪能够监测出荧光到达预先设定阈值的循环数与病毒核酸浓度有关,病毒核酸浓度越高, Ct值越小。不同生产企业的产品会依据自身产品的性能确定本产品的阳性判断值。
❷ 做核酸检测的正确方法
5月11日,武汉市新冠肺炎疫情防控指挥部涉疫大数据与流行病学调查组印发紧急通知,决定以10天为期,在武汉市范围内开展全员新冠病毒核酸筛查。而在全国各地也有一些朋友好奇,核酸检测到底检测哪个部位?鼻咽拭子和口咽拭子有何不同?做核酸检测时有哪些注意事项?
首都医科大学附属北京地坛医院感染中核酸检测标本可以采集深部痰液、鼻咽拭子和口咽拭子。其中口咽拭子和鼻咽拭子统称为咽拭子,经口的为口咽拭子,经鼻的就是鼻咽拭子。
口咽拭子
鼻咽拭子
做核酸检测时,我们需要注意什么呢?
在做核酸检测前2小时尽量避免进食,以免引起呕吐;
采样前30分钟不应吸烟、喝酒、咀嚼口香糖等;
检测者需要正确佩戴口罩,检测前取下口罩,检测后立即戴好,可准备一个备用口罩,污染后方便及时更换;
在采集鼻咽拭子前检测者应告知采集人员是否鼻中隔弯曲及鼻腔手术史,过程中可能出现鼻部酸痒感,刺激打喷嚏,可立即用纸巾或手肘遮挡;
鼻咽拭子采集后可能出现少量鼻腔出血,一般不需要特殊处理,如出血量较多请及时到医院进行处理;
在采集口咽拭子时检测者头后仰,张口发出“啊”音,有助于暴露咽喉,但过程中会出现刺激性干咳、恶心、呕吐等症状,检测者可配合采集人员尽量放松、深呼吸;
核酸检测前后都需要注意手部卫生,可使用免洗手消毒液或免洗酒精擦拭双手。
血清抗体检测不受饮食影响 无需空腹
一般感染新冠病毒7-10天后,人体会产生针对病毒的特异性抗体。最先出现的是IgM抗体,随后会出现IgG抗体,所以检测这些特异性抗体,可以判断人体是否感染过病毒,而检测方法就是血清抗体检测。
血清抗体需要抽取检测者2-4mL的静脉血液进行检测,检测结果不受饮食和药物影响,因此检测前不需要空腹。
为落实好新冠肺炎疫情常态化防控,全国各地陆续公布“核酸检测机构名单”,推动重点人群“应检尽检”、其他人群“愿检尽检”。目前国家卫生健康委推出“核酸检测机构查询”服务,在国务院客户端上线,目前已有北京、天津、河北、辽宁、黑龙江、上海、江苏、安徽、福建、山东、河南、湖北、湖南、广东、广西、海南、四川、贵州、云南、宁夏、新疆生产建设兵团上传的1226家检测机构。
❸ 核酸检测应该注意事项
一、核酸检测流程:
(1)发热门诊患者:可在发热门诊进行核酸采集,检测结果一般在发热门诊领取。
(2)入院患者或自愿接受核酸检测人员:挂号后在各专科门诊开具相关检测单,缴费后按照指示牌到“核酸采集门诊”进行采样,检测结果可到门诊自助机打印领取。
(3)急诊需要住院的患者:急诊就诊的危急重症在急诊科进行核酸采集,采集后到相应科室住院,检测结果在门诊自助机打印领取。
二、核酸检测怎么做?
新型冠状病毒的核酸检测取样方法很简单,只要“轻轻一抹”。到了发热门诊或者是相应的检查室,工作人员会让患者张开嘴,用一个像棉签一样的拭子去擦拭扁桃体和咽隐窝附近的分泌物,也可以通过鼻腔取鼻咽后部的分泌物,然后放到试管里面,再交给检验科去做相应的病毒核酸的检查。
三、核酸检测的注意事项
(1)采样前请清水漱口,2小时内避免进食。
(2)采样前30分钟请勿吸烟、勿喝酒、勿嚼口香糖等。
(3)来医院体检时,请尽量选择非公共交通工具。
(4)进入采样场地前,请配合工作人员进行体温检测及流行病学调查。
(5)被检测者必须佩戴口罩,同时准备一个备用口罩。
(6)所有等候检测人员一定要保持1米以上距离,避免交谈。
(7)采集完毕后立即洗手或使用速干手消毒剂擦拭双手,戴上备用口罩。
❹ 核酸检测流程
1、首先,医务人员会使用咽拭子擦拭受检者鼻腔或者喉咙扁桃体处,采集唾液分泌物,这个过程其实蛮疼的。
❺ 做核酸三个人检测的棉球放在一个瓶子里面不知道是什么意思
这只是例行核酸筛选,若发现里面有感染者,再次逐一检测。
“混采”模式,不会影响核酸检测的敏感性。
在现场采样中,如采用“混采”,要注意的是有序安排,如5人一组,每人持各自的条码,采样时每采一人,将该人条码贴至采样管上,这样就可有效地避免采样可能弄混的问题。
对于发热门诊有症状患者、密切接触者等高风险人群检测,还是应该采用单采单检。对于低风险人群的筛查,则可以优先选择“混检”。
核酸检测注意事项:
核酸检测前2小时尽量避免进食以免引起呕吐,采样前30分钟不应吸烟、喝酒、咀嚼口香糖等。请携带身份证件,按照社区通知到达检测地点。天气寒冷,检测排队时间可能较长,做好个人防寒保暖。保持人际1米以上距离,有序排队,勿拥挤,避免交谈。
采样过程中会出现刺激性干咳、恶心、呕吐等症状,检测者尽量放松、深呼吸。由于个体差异、耐受性、既往病史不同,存在出血、感染、心脑血管意外等少见并发症和不良后果。
❻ 核酸检测是怎么做的
1、核酸检测是分子生物学检查,一般是用于检测病原体的核酸。这种检测方法直击病毒的RNA或DNA结构,检测血液中是否存在病毒核酸,诊断有无病原体感染。
2、病毒的特点就是形态非常小,在普通光学显微镜下看不到,肉眼更是无法直接观察。但每种病毒都有其独特的基因序列,通过检测病人体内的病毒核酸,就可判断病人体内是否存在病毒。
3、核酸检测原理:以病毒独特的基因序列为检测靶标,通过PCR扩增,使我们选择的这段靶标DNA序列指数级增加,每一个扩增出来的DNA序列,都可与我们预先加入的一段荧光标记探针结合,产生荧光信号,扩增出来的靶基因越多,累积的荧光信号就越强。而没有病毒的样本中,由于没有靶基因扩增,因此就检测不到荧光信号增强。所以,核酸检测,其实就是通过检测荧光信号的累积来确定样本中是否有病毒核酸。
❼ 做核酸检测需要注意什么
做核酸检测需要注意:带好证件、不进食、戴口罩、少吞咽、放轻松、早离开。
1、带好证件
带好身份证或户口本,到最近的检测点进行采样。
2、不进食
采样前2小时避免进食,前30分钟不喝水、不吸烟喝酒、不咀嚼口香糖。
3、戴口罩
排队时戴好口罩,保持一米线距离。
4、少吞咽
临检时要减少吞咽动作,不做清嗓子动作。
5、放轻松
采样时头往后仰,张口发出“啊”音,尽量放松、深呼吸。
6、早离开
采样后立即戴好口罩,离开采集地点。
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个人防护不能松懈
目前,全球新冠疫情仍在蔓延,国内连续出现新增本土病例,呈零星散发和局部聚集性疫情交织叠加态势,当前仍然不能放松警惕。
这个冬季还是需要做到戴口罩、保持社交距离、勤洗手等个人防护工作,做好自己健康工作的“第一责任人”,坚持防疫“三件套”,牢记“五还要”。让个人防护成为日常行为的标配,让健康习惯成为每个人的“无形防护服”。
❽ 核酸检测怎么做
核酸检测需要去正规的医院或者防疫中心进行检测。
检测步骤:
1、首先,核酸检测盒子,也就是现在用于新冠状病毒检测的方式,这个盒子中主要检测“法宝”采用咽拭子。用咽拭子擦拭咽后壁及双侧咽扁桃体处各5-10次,且不断旋转拭子。
2、医务人员进行留样,将拭子头浸入细胞保存液中,折断尾部后立即旋紧管盖子。
3、保存,将样本管放入密封袋中及时送检,而送检过程中需要严格的运输环境,2-8摄氏度保存。
4、操作核酸提取(反应管理),将灭活病毒后的样本进行核酸提取,用于后续检测。
5、荧光PCR核酸检测,也就是.上机器检测,将提取物进行荧光PCR扩曾反应,需要70--80分钟。
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1、新冠病毒的核酸检测已经是比较成熟的检测方法了,只要在咽喉部位擦拭几秒钟就可以采集到标本。
2、通过分析判断是否有新冠病毒的核酸成分,可以尽早发现感染者,甚至在感染者出现症状前就可以检测到阳性。
3、感染者经过隔离治疗后咽拭子检测阴性说明病毒已经清除,不具有传染性了。目前两次咽拭子核酸检测阴性是确诊病例和无症状感染者解除隔离的标准之一。
❾ 核酸检测需要什么准备
做核酸检测前一定要保证一个充足的睡眠,不要熬夜,并且在检测前两个小时内不要吃东西,以免引起呕吐,还有就是尽量不要吸烟,还有饮酒。也要做好心理准备,不要过于紧张,不要让自己有太大的心理压力。检测完之后等待结果就可以,一般结果出来之后很多都会发信息的,大多数在7个工作日左右都能出来,检查结果准确率也是比较高的。
根据你所描述的情况,目前根据国内的形势可以申请进行核酸检测,不需要准备任何东西。
意见建议:进行核酸检测以后,通常情况下,48小时左右能够告诉你结果。当然如果你有症状或者是有疫区的人接触时可以进行检查,否则的话不建议进行。
核酸检测是确定受检人员是否感染新冠病毒的有效途径,随着复工大潮的掀起,近日很多人去医院、疾控中心等机构接受核酸检测。那么做核酸检测之前有什么需要注意的呢?能不能喝水、进食呢我们一起来了解一下。
一、核酸检测注意事项
1. 避免在进食后2小时内采集,以免引起呕吐;
2. 釆样前30分钟请勿吸烟、如喝酒、嚼香糖等;
3. 尽量在单独的密闭空间采样,采样后开窗通风;
4. 任何时候都不要用手或其他物品触及拭子采样冠(棉签前端);
5. 检测者要戴口罩,同时准备一个备用口罩;
6. 要保持人际1米以上距离,勿拥挤;
7. 接受咽拭子采样时,将口罩取下折叠封装在塑料袋里放入口袋中;
8. 釆集完样品后立即洗手或用免洗酒精擦拭双手,戴上备用口罩,将废弃口罩投入指定医用垃圾桶。
❿ 核酸检测需要注意什么怎样能保证准确率
在做核酸检测的过程当中,为了保证它的准确率,首先我们应该注意的是检测之前两小时尽量不要进食也不要喝饮料,将自己的嗓子清好,在检测的过程当中记得张口发出啊的声音,而且还要准备好自己的身份证件。
在去年春节的时候,我国就因为新冠疫情而各个领域都放缓了脚步,随之而来的就是大面积的核酸检测,因为只有核酸检测才能够发现哪些人患有新冠肺炎,这也是目前最为准确的一种方式,在新冠疫情防控的过程当中发挥了至关重要的作用,如果没有核酸检测根本就不知道疫情的分布,现在我国已经将疫情控制得非常好,但是仍然有一些中高风险地区的人们需要做核酸检测,目前核酸检测一共有三种,分别是捅鼻子、捅喉咙、还有一种是肛门拭子,这三种方法当中捅喉咙的方式准确率比较大,肛门试纸也是最近新出来的一种。
我们应当积极的配合工作人员的核酸检测,不求为疫情作出贡献,也不要给他们添麻烦。